På Veterinært Laboratorium, Kjellerup bruges MIC-metoden (Minimum Inhibitory Concentration) til at fastlægge en bakteries følsomhed for antibiotika. Dette foregår ved at tilsætte en renkultur af bakterien i 96 brønde med to-folds fortyndinger af forskellige antibiotika og aflæse eventuel vækst i brøndene. Koncentrationen i den brønd, hvori bakterien ikke længere kan vokse, kaldes for MIC-værdien, og er altså den mindste koncentration, som kan hæmme væksten af bakterien.
MIC-værdien angives på vores laboratoriesvar sammen med en tolkning. Tolkning af MIC-værdien kan enten være baseret på et epidemiologisk eller et klinisk breakpoint.
Klinisk breakpoint
Et klinisk breakpoint for en bestemt bakterie/antibiotikum-kombination er fastlagt ud fra viden om et stofs farmakodynamik og farmakokinetik (absorption, vævsfordeling, vævskoncentration, udskillelse osv.). Det er fastlagt ud fra en bestemt dosering af det givne antibiotikum til en infektion i et bestemt organ forårsaget af den givne bakterie hos en specifik dyreart. Derfor kan det være vanskeligt at ekstrapolere ud fra kliniske breakpoints, da de afhænger af mange forskellige faktorer (dyreart, dosering, behandlingslængde, administrationsvej og infektionstype).
Laboratoriet bruger kliniske breakpoints fra CLSI (Clinical Laboratory and Standards Institute) samt enkelte fra EUCAST (European Commitee on Antimicrobial Susceptibility Testing).
Ved klinisk breakpoint angives ofte en intermediær værdi, hvor bakterien kan hæmmes, hvis dosis øges.
Epidemiologisk breakpoint/cut-off værdi
Et epidemiologisk cut-off (ECOFF) er fastlagt ud fra mange MIC-bestemmelser på den samme type bakterie og angiver den højeste koncentration af antibiotikum, som en bakterie uden resistensgener (vild-type) kan vokse ved. Da dette fastlægges ud fra laboratorie-undersøgelser, er det billigere og hurtigere end at skulle lave kliniske breakpoints, som ofte kræver langvarige og bekostelige forsøg.
Epidemiologiske cut-offs er rigtigt gode til at overvåge udvikling af resistens i en population af bakterier over tid, men de forudsiger ikke, hvorvidt en behandling kan forventes at have effekt.
Laboratoriet bruger epidemiologiske cut-offs fra EUCAST samt foreløbige (tentative) epidemiologiske cut-offs bestemt ved projekter financieret af Svineafgiftsfonden (SAF) og Kvægafgiftsfonden (KAF) i 2021 for de bakterie/antibiotikum-kombinationer, hvor der ikke findes andre tilgængelige breakpoints (bl.a beskrevet i: ”Nye praksis-relevante resistenspaneler for grisepatogener”, Nonneman et al, Dansk Veterinær Tidsskrift 04/2022). Hvis det ikke har været muligt at finde et egnet breakpoint, angiver vi tolkningen som ”ukendt”. I dette tilfælde skal den praktiserende dyrlæge selv tolke MIC-værdien ud fra viden om stoffets farmakodynamik og farmakokinetik.
Tolkning
Laboratoriet bestræber sig på at anvende internationalt anerkendte kliniske breakpoints fra CLSI, men da der sjældent er veterinære kliniske breakpoints tilgængelige, er en del tolkninger også baseret på epidemiologiske cut-off værdier. Hvilke kan ses i tabellerne under: ” Oversigt over aktuelle antibiotika, testintervaller og breakpoints”.
Når der er anvendt epidemiologisk cut-off til tolkning, bør man skele til MIC-værdien. En bakterie, som tolkes som følsom jf. sit epidemiologiske cut-off, kan nemlig godt være klinisk resistent, hvis f.eks. typen af antibiotika ikke opnår tilstrækkelig høj koncentration i den del af kroppen, man ønsker at behandle. Her skal viden om et stofs farmakodynamik og farmakokinetik inddrages af den praktiserende dyrlæge. Ligeledes kan en bakterie, som tolkes som resistent jf. sit epidemiologiske cut-off, godt være klinisk følsom, da der muligvis opnås tilstrækkeligt høje vævskoncentrationer til at dræbe/hæmme bakterien til trods for tilstedeværelsen af resistensgener.
Usikkerhed
Ved MIC-bestemmelse er den indbyggede usikkerhed i metoden +/-1 fortynding. Når man foretager resistensbestemmelse i laboratoriet, vil der altid være en vis usikkerhed forbundet med resultatet, da bakterien kan vokse og opføre sig anderledes in vivo, end den gør ved vækst i petriskåle på laboratoriet.